雷帕霉素和紫杉醇治疗激素非依赖性前列腺癌的研究

通过前列腺癌细胞株的体外实验、前列腺癌动物模型的建立及动物实验对照研究雷帕霉素和紫杉醇对激素非依赖性前列腺癌的作用。方法:1.采用噻唑蓝（MTT）比色法观察雷帕霉素、紫杉醇、雷帕霉素+紫杉醇对不同前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）细胞增殖的影响。2.采用流式细胞技术检测不同前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）在雷帕霉素、紫杉醇、雷帕霉素+紫杉醇分别作用后的细胞凋亡情况。3.应用裸鼠分别建立不同前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）的动物模型。4.应用不同前列腺癌细胞株（LNCaP-C4-2、PC-3）的动物模型研究雷帕霉素、紫杉醇、雷帕霉素+紫杉醇对激素非依赖性前列腺癌细胞生长的影响。结果:1.雷帕霉素对三种前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）均有较好的抑制作用,且表现出较好的剂量依赖关系,随着雷帕霉素浓度的提高,其抑制肿瘤细胞的作用也越强。对于LNCaP-C4细胞株,同对照组相比,当雷帕霉素浓度为0.01micro;mol/L时,其抑制肿瘤细胞的作用开始出现显著性差异;而对于LNCaP-C4-2、PC-3细胞株,雷帕霉素浓度为0.001micro;mol/L时,其抑制肿瘤细胞的作用同对照组相比已经具有显著性差异。2.紫杉醇对三种前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）均有较好的抑制作用,且表现出较好的剂量依赖关系,当紫杉醇浓度为0.2ng/ml时,同对照组相比,紫杉醇已经表现对三种前列腺癌细胞株有显著的抑制作用（p0.05）随着紫杉醇浓度的提高,其抑制肿瘤细胞的作用也越强。3.10nmol/L的雷帕霉素、1ng/ml的紫杉醇对前列腺癌细胞株的抑制作用同对照组相比已经有了显著差异（p0.05）,而5nmol/L的雷帕霉素+0.5ng/ml的紫杉醇组对所有三种前列腺癌细胞株的抑制作用均显著高于10nmol/L的雷帕霉素组和1ng/ml的紫杉醇组。4.雷帕霉素和紫杉醇均有较好的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。5.前列腺癌细胞株LNCaP-C4-2和PC-3的出瘤时间明显短于LNCaP-C4细胞株,并且出瘤后肿瘤的生长速度亦明显快于LNCaP-C4细胞株。6.LNCaP-C4-2动物实验中,在到达实验终点（肿瘤体积长到1000mm3）的时间方面,雷帕霉素组和紫杉醇组晚于空白对照组约2周左右,差异具有显著性。而雷帕霉素+紫杉醇组肿瘤体积长到1000mm3的时间较单独使用2mg/kg/d雷帕霉素和紫杉醇20mg/kg/次又推迟大约1周左右。在LNCaP-C4-2动物模型组可以看出,相比对照组,三个给药组（B组、C组、D组）在给药后第2天开始即表现出较好的肿瘤抑制作用,在对肿瘤体积的观察方面,给药组肿瘤体积的增加显著慢于对照组。7.PC-3动物实验中,在到达实验终点（肿瘤体积长到1000mm3）的时间方面,雷帕霉素组和紫杉醇组晚于空白对照组约2周左右,差异具有显著性。而雷帕霉素+紫杉醇组肿瘤体积长到1000mm3的时间较单独使用2mg/kg/d雷帕霉素和紫杉醇20mg/kg/次又推迟大约12天左右。PC-3动物模型组可以看出相对于对照组（a组）,雷帕霉素组（b组）、紫杉醇组（c组）及联合给药组（d组）对肿瘤生长的抑制作用是显著的,此种差异在给药后的第2天即已表现出来。结论1.雷帕霉素对三种前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）均有较好的抑制作用,且表现出较好的剂量依赖关系。而且相同作用浓度条件下,对LNCaP-C4-2、PC-3细胞株的抑制要强于对LNCaP-C4细胞株的抑制。2.紫杉醇对三种前列腺癌细胞株（LNCaP-C4、LNCaP-C4-2、PC-3）均有较好的抑制作用,且表现出较好的剂量依赖关系。相同浓度条件下,对此三种细胞株的抑制程度相当。3.雷帕霉素及紫杉醇可以较好的诱导肿瘤细胞的凋亡。4.人源性前列腺癌细胞株（LNCaP-C4,LNCaP-C4-2,PC-3）异种皮下种植的实验方法均能取得较为满意的成功率。5.三种前列腺癌细胞株肿瘤的生长速度也不*相同。出瘤初期的生长速度LNCaP-C4

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