ELISA试剂盒为何“罢工“？六大变质原因深度剖析

一、方法学缺陷：竞争抑制法成重灾区

操作时差效应：竞争抑制法(HBeAb/HBcAb检测常用)易因加样时间差异导致不-公平竞争，重复性差

质量控制难点：相较于双抗体夹心法等，该模式对温育时间敏感度更高

二、试剂因素：批间差异与保存条件

生产波动：不同批次间活性成分浓度存在天然差异，建议选择长批号试剂

储存不当：2-8℃避光保存为基本要求，反复冻融会破坏酶标记物活性（尤其HRP标记抗体）

分装技巧：使用率低的试剂应分装保存，避免整盒反复冻融

三、样本污染：隐形杀手清单

干扰类型具体表现内源性类风湿因子、补体、异嗜性抗体等造成假阳性外源性溶血、细菌污染、反复冻融标本导致蛋白降解

四、操作失误：细节决定成败

加样误差：未更换吸头导致交叉污染

温育失控：温度波动超过±1℃显著影响抗原抗体结合

洗涤不彻-底：残留物质干扰显色反应

五、环境因素：容易被忽视的威胁

光照破坏：底物B对光敏感，需避光操作

化学污染：实验台面消毒剂残留可能抑制酶活性

挥发损失：开盖时间过长导致液体试剂浓度改变

六、过期失效：时间成本不可逆

活性衰减：超过有效期后抗体效价急剧下降

标准品失效：稀释后的标准品禁止二次使用

实用解决方案

采用真空采血管避免溶血

每板设置复孔提高数据可靠性

建立试剂验收记录表追踪批号性能

温馨提示：定期校准移液器，建议每季度进行1次重力校准（特别是微量移液器）