上海劲马：ELISA试剂盒基础知识问答普及篇

许多科研爱好者们在做ELISA试剂盒实验时总会碰到各种各样的问题，那么为了避免问题再次困扰到您的实验，上海劲马今天要为您介绍的是：ELISA试剂盒基础知识问答普及篇。
问题：ELISA加样时如何防错？
解决方案：
（1）用一张写满字的纸，字越多越好，比如报纸，垫在下面，这样，加过标本的小孔看过去下面的字会变小，没加的字正常，非常容易区分。
（2）可以利用液面反光与没有加的孔加以区别
（3）在标本加完后，再把加样枪全压下，使液面产生小气泡，可以区分 
问题：如何正确使用酶结合物？
解决方案：
1.酶结合物的稀释液 
在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质（例如1%BSA或5%脱脂奶粉），通过竞争抑制酶结合物在固相载体上的非特异性吸 附。一般还加入能够抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂，如吐温20（0.05%的浓度较为适宜）。 
2.正确稀释酶结合物 
酶 结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。 
酶结合物在使用前稀释，稀释后的酶 结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。 
问题：血清如何避免沉淀物的产生？
解决方案：
1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法（-2O。C至4。C至室温），若血清解冻时改变的温度太大（如-20。C至37。C），实验显示非常容易产生沉淀物。
2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生
3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。
4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
5、若必须做血清的热灭活，请遵守56。C，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。 [5]血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。
关于上海劲马为您介绍的以上部分解决方案对您的实验是否有所帮助呢？如果您的ELISA试剂盒实验还有其他疑问，请登录我司留言或咨询我司在线工作人员，我们将一一为您解答。
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