Elisa试剂盒具体操作方法表格版发布

更新时间：2015-02-05 浏览次数：1783

Elisa试剂盒具体操作方法表格版发布

根据上海劲马生物多年来Elisa试剂盒的操作经验，我司特在新春佳节来临之际，对Elisa试剂盒操作步骤建立表格版文档，供大家详细参考Elisa试剂盒的具体操作步骤。咨询我司试剂产品，年末有特惠活动哦。

方法步骤	间接法（测抗体）	双抗体夹心法（测抗原）	竞争法（测抗原）	抑制性测定法
1	包被抗原：用包被缓冲液稀释抗原至zui适浓度（5～20μg/ml）各0.3ml加于微反应板每个凹孔中,4℃过夜或37℃水浴2～3小时,贮存冰箱	包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至zui适浓度（1～10μg /ml），每凹孔加0.3ml，4℃过夜，或37℃水浴3小时，贮存冰箱	包被特异性抗体：同左	包被抗原：同左
2	洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含0.05%吐温-20）洗3次，每次5分钟	同左	同左	同左
3	加被检标本：每凹孔加入用含有0.05%吐温-20的稀释缓冲液稀释的被检血清各0.2ml，37℃，作用1～2小时	每凹孔加入0.2ml用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，37℃作用1～2小时。	分2组,a组加酶标记抗原和被检抗原混合液0.2ml，另一组只加酶标记抗原液0.2ml，37℃作用1～2小时。（混合液可作成不同稀释度）。	a组加参考抗体和被检抗原混合液0.2ml，另一组加参考抗体与等量稀释剂0.2ml，37℃作用1～2小时。
4	洗涤：重复2	同左	洗涤：同左	洗涤
5	加入酶结合物：每凹孔加入稀释缓冲液稀释的酶结合物0.2ml 37℃作用1～2小时	加入0.2ml用稀释缓冲液稀释的酶标记特异性抗体溶液，37℃作用1～2小时或由预试实验确定作用时间。		各加入0.2ml抗参考抗体的酶结合物37℃作用1～2小时
方法步骤	间接法（测抗体）	双抗体夹心法（测抗原）	竞争法（测抗原）	抑制性测定法
6	洗涤：重复2	同左		洗涤
7	加入0.2ml底物溶液于每个凹孔,(O.P.D或O.T)，室温作用30分钟（另作一空白对照，0.4ml底物加0.1ml终止剂）。	同左	同左	同左
8	加终止剂：每凹孔加2M H₂SO₄或2M柠檬酸0.05ml。	同左	同左	同左
9	观察记录结果：目测或用酶标比色计测定（O.P.D用492nm）O.D值。	同左	用酶标比色计测定a、b两组O.D值，并求出a、b、O.D值的差数	同左

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