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荧光定量PCR系列问题之无Ct值(信号)出现

更新时间:2015-05-28 浏览次数:16594

荧光定量PCR系列问题之无Ct值(信号)出现有以下几种可能原因及解决方法解析:欢迎阅读参考。    
反应循环数不够    
一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环(如至45循环), 但高于45个循环会增加过多的背景信号
检测荧光信号的步骤有误    
一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号
引物或探针降解    
可通过PAGE电泳检测其完整性
模板量不足    
对未知浓度的样品应从系列稀释样本的zui高浓度做起
模板降解    
避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况发生
目的基因在组织中不表达或者表达量低    
尝试其它组织

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