血清一氧化氮NO含量检测方法推荐

一氧化氮（NO）试剂盒说明书

硝酸还原酶法

一、实验仪器：

试管、微量移液器、旋涡混匀器、离心机、37°C 恒温水浴锅，可见分光光度计（550nm） 二、适用范围：

本试剂盒可测血清、血浆、培养细胞、培养液及动植物组织样本中 NO 含量 三、测定意义：

一氧化氮(  NO  )是近年来生命科学研究领域中zui热点课题之一，与心血管、神经、胃肠、泌尿、

免疫系统、肾病、肝病、糖尿病、肿瘤、创伤、感染、器管移植排斥反应和性功能调控等都有密切关 系。NO是一种新的免疫分子和炎症介质、介导内毒素、TNF、IL-1β、IL-6 等细胞因子的病理作用。

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NO化学性质活泼，体内代谢转化为亚硝酸盐(NO2  )和硝酸盐(NO3  )，血清NO2  与NO3  浓度之和 (NO2  + NO3  )，

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才能准确代表体内NO水平。血清  (NO2  +NO3  ) 含量测定，国内有的单位采用金属镉还原法，但该法操

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作繁琐 (血清需除蛋白)，反应不易控制  (金属镉可将NO2  进一步还原)，且不能完全将NO3  还原为NO2  ，

准确性差。 四、操作表：

混匀，37℃准确水浴 60 分钟

充分旋涡混匀 30 秒，室温静置 10 分钟，3500～4000  转/分，离心 10 分钟，取上清显色。

混匀，室温静置 10 分钟，蒸馏水调零，550nm，0.5cm 光径,测各管吸光度值。

五、计算公式：

1、血清(浆)中 NO 含量计算公式：

NO含量

测定OD值 − 空白OD值        标准品浓度      样品测试前

=                                           ×                          ×

(μ mol / L)

标准OD值 − 空白OD值

(100μ mol / L)

稀释倍数

2、组织样本中 NO 含量计算公式

NO含量

测定OD值 − 空白OD值

=                                           ×

标准品浓度

待测样本蛋白浓度

÷

(μ mol / gprot*)

标准OD值 − 空白OD值

(20μ mol / L * *)            ( gprot / L)