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13817140470更新时间:2016-05-10 浏览次数:40083
一抗和二抗浓度和孵育时间比对
一抗和二抗在实验中浓度及孵育时间有所改变,请按产品说明书上提示时间操作,本章小编为您具体解析一抗和二抗浓度和孵育时间比对,欢迎参考学习!
一抗孵育条件在免疫组化反应中zui重要,包括孵育时间、温度和抗体浓度。一抗孵育温度有几种:4℃、室温、37℃,其中4℃效果佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般37℃1-2h,而4℃过夜和从冰箱拿出后37℃复温45min。具体条件还要摸索。
二抗孵育条件:二抗一般室温或37℃30min-1h,具体时间需要摸索,而浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度。但在免疫组化中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下,然后去摸索一抗浓度和孵育时间。建议一抗反应在4℃佳,反应温和,但时间超过16~24h。
抗体无论是保存还是运输都应尽可能地避免反复冻融,收到抗体后请根据实验的需要,对抗体进行分装,避免同一管抗体反复冻融(反复冻融会导致抗体空间结构变 性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力)。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,抗体活性大部分都可以维持数年。 请谨记,无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确处理和保存抗体。
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