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求解:ELISA吸光值一直在衰减是什么原因?

更新时间:2018-04-12 浏览次数:2305

    科研朋友们,您在做实验时是否遇到过ELISA吸光值一直在衰减这样的现象呢?昨天上海劲马业务员就收到贵阳医学院的王老师前来咨询的一个问题:加完显色液(购买)显色一定时间后,再加终止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即测试其吸光度值,等过几分钟再测试吸光度值,发现两次测得的吸光度值发生衰减。第二次均小于次。并且,加终止液时,从条加到第12条后,测试发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。前提是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白,我该怎么办?经过我公司技术专员的分析,原来ELISA吸光度值衰减是可以这样巧妙应对的。  

            

    其实具体的原因也很简单,有可能是显色液的质量不够好。一般情况下,终止反应后OD值的下降前期不是很明显。终止后,吸光度值是会随着时间衰减,所以一般是加完终止液后立即测,这样比较准。再次分析12条显示逐级递减的原因看看是否是:
① 显色时间调整,如果您现在的显色时间是10MIN,那调整到30MIN,再加终止液,观察上述现象是否出现。    
② 终止液中加入少量甘油看下怎么样。建议您使用RD品牌的ELISA试剂盒,显色时间是30分钟,终止后要求在30分钟内检测,加入终止液后,在加入终止液后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高。拟合值能达到四个9。 


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