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对ELISA试剂盒测定结果有影响的原因有哪些?您知道吗?


发布日期:[2018-08-16] 共阅[362]次

    ELISA试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定,具有灵敏度高,操作简单等优点,但是在具体实验过程中影响因素较多,并且要按照严格的说明要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。且劲马所有产品仅用于科研实验,不用于任何临床诊断。

    影响ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。劲马小编就标本因素对ELISA测定的影响做如下总结。

一、类风湿因子
人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性。
解决办法
1.用F(ab)2替代完整的IgG;
2.标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效);
3.检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。

二、补体
ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连接起来,从而造成假阳性。
解决办法
1.用EDTA稀释标本;
2.用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。

三、嗜异性抗体
人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。
解决办法
可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。

四、嗜靶抗原的自身抗体
抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。
解决办法
测定前需用理化方法将其解离后再测定。

    以上就是劲马小编为大家总结出的zui有可能影响ELISA试剂盒测定结果的原因及解决办法,同时标本中其它成分也可能会对ELISA测定结果有干扰作用,如血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等。所以做实验前一定要仔细确认,上海劲马提供技术指导服务,如您在实验中遇到任何自己不明白的问题,都可咨询我司技术专员,我们将以的产品和完善的服务让您满意,上海劲马主营:ELISA试剂盒,生物试剂,细胞培养,血清,免疫组化抗体,一抗,二抗,单克隆和多克隆抗体等,想了解更多产品,欢迎前来咨询我司业务员,期待您的来电!

                

 

主营:ELISA检测试剂盒;免疫组化试剂盒,胎牛血清;酶联免疫试剂盒,进口抗体,生物试剂 公司地址:上海市闵行区莘庄工业园区金都路3688号E幢101-106室 邮政编码:201100 
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