ELISA实验新手必知

    收集标本：血清、血浆（EDTA）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融；

    洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）；

    标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成400ng/ml的溶液。设标准管8管，*管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在*管中加入400ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。

检测程序：
加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。每孔中加入抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
洗板：同前。每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
洗板：同前。每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。每孔加入100ul终止液混匀。30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

结果计算与判断方法：
1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0 ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IGF-1R含量。

试剂盒优点有哪些？
1.系出名门: 试剂盒原料如抗体对、标准品、酶结合物和底物等均选自大厂，并经过严格的甄选。
2.认可: 目前已有超过290篇SCI文献引用，其中包括Nature, PNAS等杂志引用。同时有超过个1100篇国内核心期刊、博士及硕士学位论文引用。
3.品质: 所有指标试剂盒均经过近乎苛刻的质检标准。对不合格产品执行零容忍。
4.广泛使用: 全国超过2000个客户在使用，累计检测超过70万样本。
5.品种齐全: 提供近200种常用指标检测试剂盒，如细胞因子、趋化因子及其他可溶性蛋白等。提供人、大鼠、小鼠、猴和牛的相关检测试剂盒。

它的注意事项是什么？
1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。
2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致度误差及OD值错误地升高。
3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。
4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
5.我司所售试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！

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