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兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α) ELISA试剂盒

产品型号:
更新时间: 2016-04-28
描述:兔子肿瘤坏死因子αELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α 的浓度呈比例关系。

产品介绍

 

产品名称:兔子肿瘤坏死因子αELISA试剂盒

英文名称:TNF-α

产品性状:液体

检测范围:62.5 pg/ml - 4000 pg/ml 

zui低检测限:15.6 pg/ml 

试剂盒组成:48孔/96孔

主要用途:科研检测

有效期:6个月 

保存:2-8℃

兔子肿瘤坏死因子αELISA试剂盒 )说明 :

1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。 

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 

3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。 

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 

兔子肿瘤坏死因子α试剂盒组成及试剂配制 

1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 

2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。 

3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 

4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 

6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 

9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 

10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 

兔子肿瘤坏死因子α标本采集及保存 

1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 

3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 

注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 

标本的稀释原则: 

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。zui后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。 

标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为4000 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释4000 pg/ml,2000 pg/ml,1000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 

如配制2000 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)4000 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 

生物素标记抗体的稀释原则: 

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则: 

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 

 

 

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