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试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被总甲状腺激素(TT4)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的总甲状腺激素(TT4)呈正相关。

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